Tadalafil and Sildenafil illicit association: Stability- indicating HPLC method, photodegradation kinetic and toxicological studies

Abstract The illicit market of counterfeit medicines containing sildenafil and tadalafil has been causing serious public health problems. Thus, further studies on this illicit association are needed. A stability-indicating HPLC method was developed for simultaneous determination of tadalafil (TAD) and sildenafil (SIL) using a C18 column (250 x 4.6 mm, 5 µm). Detection was achieved at 284 nm, for TAD, and 292 nm, for SIL. The method was considered to be specific, linear, precise, accurate, robust, and sensitive. In the photodegradation kinetic studies, the drugs showed a first-order reaction rate when isolated, and zero-order when associated. Toxicological assays demonstrated that the photodegraded drugs decreased cell viability in compared to non- degraded drugs, suggesting cytotoxic activity. Additional, mutagenic activity was not observed under the tested conditions. Photodegraded drugs, in association, depicted DNA damage index, suggesting genotoxic effects. The obtained results will be able to support the forensic intelligence laboratories, as well as to alert the population about the risk inherent to consuming counterfeit products.

Light sheet microscopy for histopathology applications

Light sheet microscopy (LSM) is an evolving optical imaging technique with a plane illumination for optical sectioning and volumetric imaging spanning cell biology, embryology, and in vivo live imaging. Here, we focus on emerging biomedical applications of LSM for tissue samples. Decoupling of the light sheet illumination from detection enables high-speed and large field-of-view imaging with minimal photobleaching and phototoxicity. These unique characteristics of the LSM technique can be easily adapted and potentially replace conventional histopathological procedures. In this review, we cover LSM technology from its inception to its most advanced technology; in particular, we highlight the human histopathological imaging applications to demonstrate LSM's rapid diagnostic ability in comparison with conventional histopathological procedures. We anticipate that the LSM technique can become a useful three-dimensional imaging tool for assessing human biopsies in the near future.

Stability-indicating capillary zone electrophoresis assay for the analysis of linezolid in tablets

A simple and fast alternative methodology using capillary zone electrophoresis (CZE) to analyze linezolid and its cationic photodegradation products in tablets has been developed. The separation was carried out on fused silica capillary and conducted using 100 mM formic acid (pH 3.0) and by applying 30 KV voltage. Detection was performed at UV 254 nm. The optimized method was validated in terms of linearity, limits of detection and quantification, precision (repeatability), stability studies (selectivity) and accuracy. Good linearity (8-20 mg L-1) was obtained and the limit of detection was 0.95 mg L-1. The greatest advantages of the CZE method were the rapid set-up of instrumentation and capillary equilibration, short analysis time (12 min), low running cost and low waste generation. The method showed good stability in determining linezolid submitted to degradation by light and to a climatic chamber and can be used as an alternative for evaluation in stability studies of linezolid in tablets, as well as for the analysis of the drug in raw materials and finished products.

Rapid and simple method of photobleaching to reduce background autofluorescence in lung tissue sections.

Autofluorescence exhibited by tissues often interferes with immunofluorescence. Using imaging and spectral analysis, we observed remarkable reduction of autofluorescence of formalin fixed paraffin embedded tissues irradiated with light prior to incubation with immunofluorescent dyes. The technique of photobleaching offers significant improvement in the quality and specificity of immunofluorescence. This has the potential for better techniques for disease diagnosis.

Efeito do dióxido de titânio na decomposição fotocatalítica de substâncias persistentes no ambiente: corantes têxteis e interferentes endócrinos / Effect of titanium dioxide in the photocatalytic decomposition of persistent chemicals in the environment: textiles and dyes endocrine interfering

O objetivo do presente trabalho foi estudar a degradação fotocatalítica de três corantes e um interferente endócrino mediado pelo dióxido de titânio (TiO2). Foi estudada a degradação fotocatalítica de dois azo corantes comerciais, respectivamente o C.I Reactive Black 5 e o C.I Reactive Red 239. Para esse estudo foi utilizado o TiO2 P25 Evonik como catalisador e os experimentos foram realizados em solução aquosa com reator artificial equipado com lâmpada de vapor de mercúrio 125W. Nesse estudo,foram avaliados os seguintes parâmetros: concentração de TiO2, tempo de irradiação, pH, concentração inicial de corante, presença de diferentes concentrações de peróxido de hidrogênio e degradação em sistema bi-compartimental para os dois azo corantes. O outro corante estudado foi o Índigo Carmine (IC). Primeiramente foi investigada a descoloração do corante em efluente modelo usando processo físico e químico para sua remoção. Os experimentos de descoloração do efluente contendo o corante IC foram realizados usando carvão ativado no escuro e com irradiação. Além disso, o efeito do carvão ativado / TiO2 / UV foi avaliado pelo mesmo sistema. Os parâmetros da degradação do IC foram realizados, seguindo: concentração de TiO2, pH, concentração inicial de corante, presença de ânions inorgânicos, temperatura, concentração de peróxido de hidrogênio. A eficiência de três diferentes reatores (Reator 1 – reator do tipo batch com lâmpada vapor de mercúrio 125W; Reator 2 – reator do tipo batch equipado com 4 lâmpadas daylight 20W; Reator 3 – reator tubular de fluxo contínuo equipado com uma lâmpada daylight 20W) e reator batch com luz solar foram avaliados para degradação do IC.Além disso, otimizados experimentos foram realizados em planta piloto com compound parabolic collector reatores (CPC) na Plataforma Solar de Almería, Espanha, com TiO2 em suspensão e suportado. O IC foi estudado em diferentes tipos de águas, sendo elas: água destilada, água sintética moderadamente dura, água sintética e real de estação de tratamento de água residuária (ETAR). Testes ecotoxicológicos para o IC foram realizados em dois diferentes níveis tróficos de cadeia alimentar (Daphnia similis e Pseudokirchneriella subcapitata) e testes com minhocas Eisenia andrei. A degradação fotocatalítica do Bisfenol A (BPA) em diferentes tipos de águas na presença de TiO2 foi feita sob diferentes condições. O TiO2 em suspensão foi utilizado para comparar a eficiência da degradação do BPA (...) em batch e CPC reatores. O TiO2 foi suportado em esferas de vidro pelo método sol-gel e usado em reatores solares CPC em escala piloto para degradação do BPA (...) A influência das espécies reativas (...) foi avaliada. Testes ecotoxicológicos com minhocas Eisenia andrei também foram realizados para o BPA e seus produtos de degradação.

Photo-degradation effect on dissolved organic carbon availability to bacterioplankton in a lake in the upper Paraná river floodplain / Photo-degradation effect on dissolved organic carbon availability to bacterioplankton in a lake in the upper Paraná river floodplain

Dissolved organic carbon (DOC) is nowadays recognized as the main substrate and source of energy for aquatic microbial community. The great part of available organic carbon for bacterioplankton might be formed after photolytic degradation of humic material, which constitutes the major part of DOC in almost all natural waters. The effects of DOC photo-degradation were evaluated, as was its utilization by bacterioplankton, through a two-step experiment, one involving photo-degradation of DOC and the other bacterial growth on the photo-degraded substrate. Photo-degradation was responsible for the consumption of 19% of DOC, reduced SUVA254, an increase in the E2/E3 and E3/E4 ratios, in addition to modifications in the fluorescence spectra that indicated a rise in the labile fraction of DOC. However, these alterations on DOC were not reflected in differences in bacterioplankton growth, as shown by the fact that there were no significant differences in density, biomass, bacterial production, bacterial respiration and bacterial growth efficiency between treatment and control.

O carbono orgânico dissolvido (COD) é reconhecido atualmente como o principal substrato e fonte de energia para a comunidade microbiana aquática. Grande parte do COD biodisponível para o bacterioplâncton pode ser gerada após degradação fotolítica do material húmico dissolvido, que constitui a maior parte do carbono orgânico total. Neste trabalho foram avaliados os efeitos da fotodegração no COD de um ambiente húmico e a sua posterior utilização pelo bacterioplâncton, por meio de um experimento em duas etapas, uma de fotodegradação do COD e outra de crescimento microbiano sobre o substrato fotodegradado. A fotodegradação causou consumo de 19% do COD, diminuição na SUVA254, aumento nas razões E2/E3 e E3/E4 e modificações nos espectros de fluorescência apontando aumento da fração lábil. No entanto, as alterações no COD não se refletiram em diferenças no crescimento do bacterioplâncton, não havendo diferenças significativas com relação à densidade, biomassa, produção, respiração e eficiência de crescimento bacteriano.

Stability study of azithromycin in ophthalmic preparations / Estudo de estabilidade de azitromicina em preparações oftálmicas

A stability study of azithromycin in ophthalmic preparations was developed by submission to different types of light, temperature and pH, using the biodiffusion assay (cylinder 3 x 3) for the quantifications. Bacillus subtilis, ATCC 9372, was used as test organism. The used concentration range was of 50 to 200 µg/mL. The study demonstrated that the drug suffered degradation when submitted to the ultraviolet light, germicide light, solar luminosity, acid solution, basic solution and hydrogen peroxide solution. The results were analyzed by the analysis of variance (ANOVA).

O estudo de estabilidade de azitromicina em preparações oftálmicas foi realizado após exposição a diferentes tipos de luz, temperatura e pH, utilizando o método de difusão em ágar (cilindros 3 x 3) para as quantificações. A faixa de concentração foi de 50 a 200 µg/mL. O estudo demonstrou que o fármaco sofreu degradação quando submetido às luzes ultravioleta, germicida e solar, e a soluções ácida, alcalina e de peróxido de hidrogênio. Os resultados foram analisados através da análise da variância (ANOVA).

Propriedades fotoquímicas dos fotossensibilizadores Cristal Violeta e Azul de Metileno em sistemas microheterogêneos e em células cancerosas em cultura / Photochemical properties of the photosensitizer crystal violet and methylene blue in microheterogeneous systems and cancerous cells in culture

As propriedades fotofísicas e fotoquímicas de cristal violeta (CV) foram investigadas em soluções isotrópicas e verificou-se que solventes com constante dielétrica pequena favorecem a formação do par iônico, já o aumento na viscosidade do meio restringe a movimentação rotacional dos anéis aromáticos, resultando em diminuição da conversão interna e conseqüentemente. aumento na fluorescência e, portanto no rendimento quântico de fluorescência (‘fi’ ‘IND. f’) (Oliveira 2002). Os experimentos com CV foram conduzidos em micelas reversas do anfifílico aniônico bis-2-etilhexil sulfoccinato de sódio (AOT) em isooctano. A localização interfacial do CV nas micelas reversas de AOT em valores da razão molar entre água e surfactante (‘W IND. 0’) pequenos e grandes foram encontrados através da técnica de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) de próton e de carbono 13. Utilizando-se espectroscopia UV-Vis identificou-se que pares iônicos de contato estão presentes a valores pequenos de ‘W IND. 0’ e com o aumento do ‘W IND. 0’ pares iônicos separados por solventes são as espécies que predominam em solução. A comparação da eficiência de fotodegradação de CV em micelas reversas de AOT em função do ‘W IND. 0’ indicou que a fotoreatividade é maior em baixos valores de ‘W IND. 0’. Este efeito deve estar relacionado à restrição da movimentação dos anéis aromáticos de CV devido ao ambiente no qual este se localiza na micela reversa de AOT a ‘W IND. 0’ pequenos. A formação de intermediários reativos foi verificada através de Fotólise de Relâmpago a Laser e Emissão no infra-vermelho próximo, indicando a presença de espécies triplete, radical e oxigênio singlete com valor de rendimento quântico menor que 1%...

Avaliação da degradação e exaustão do revelador radiográfico em relação ao número de películas processadas: estudo baseado na qualidade das imagens radiográficas / Evaluation of degradation and exhaustion of radiographic developer in realtion to the number of processed films: study based on the quality of radiographic images

O objetivo deste trabalho foi avaliar o tempo de utilização das soluções processadoras e quantidade de filmes radiográficos que podem ser processados nessas mesmas soluções sem serem trocadas antes que ocorra degradação e exaustão desses líquidos. O método de avaliação foi a análise subjetiva da qualidade das imagens readiográficas. Para tanto, foram utilizados 269 filmes periapicais Ektaspeed Plus Kodak, do grupo E, quanto à sensibilidade, divididos em dois grupos: degradação e exaustão. Os filmes foram processados em câmara escura portátil sob luz ambiente de lâmpada fluorescentes para simular condições normais de trabalho em consultório odontológico. Após o processamento e secagem os filmes foram avaliados por cinco alunos do curso de pós-graduação em Radiologia Odontológica da FOSJC - Unesp pelo método subjetivo por meio de notas. Pôde-se constatar que para mo grupo degradação as piores notas (K < 1) foram emitidas a partir da película número 43; para o grupo exautão as piores notas foram atribuídas a partir da 192º radiografia (K = 1,8), porém neste grupo as radiografias compreendidas entre as de números 192 até 210 foram classificadas como de boa qualidade para interpretação. Conclui-se que a degradação do revelador ocorreu a partir do 21º dia do inicio do experimento, observado na 43ª radiografia, e, para o grupo exaustão,a partir da 192ª radiografia revelada, que ocorreu no nono dia da pesquisa

Photodegradation of sparfloxacin and isolation of its degradation products by preparative HPLC

Sparfloxacin, a third generation fluoroquinolone derivative, is a potent antibacterial agent active against a wide range of Gram-positive and Gram-negative organisms including Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, methicillin resistant S. aureus, Legionella spp., Mycoplasma spp., Chlamydia spp. and Mycobacterium spp. A drawback of fluoroquinolones is their photoreactivity. Sparfloxacin has been studied in terms of therapeutic activities. However, there are few published of analytical methods being applied to sparfloxacin. The aim in this study was to determine the photodegradation products of sparfloxacin, when submitted to UV light, and to characterize two of these products, designated SPAX-PDP1 and SPAX-PDP2. An accelerated study of stability in methanol solution was carried out by exposing a solution of sparfloxacin to UV light (peak wavelength 290 nm) for 36 hours at room temperature. The products were analyzed by NMR spectrophotometry, IR spectrometry and mass spectrophotometry. The results suggest that the products isolated here could be used to estimate the degradation of sparfloxacin in a stability study. However, the low activity exhibited by UV-irradiated sparfloxacin is a source of concern that demands further investigation of the mechanism of its photodegradation mechanism

Influence of photopolymerization light source on enamel shear bond strength after bleaching

Este estudo avaliou a influência do tipo de fonte fotopolimerizadora na resistência ao cisalhamento da união adesiva ao esmalte clareado com peróxido de carbamida a 10%. Setenta e dois dentes incisivos bovinos íntegros foram divididos em 6 grupos (n=12) de acordo com a realização ou não do tratamento clareador e com a fonte fotoativadora empregada: G1 ù clareamento/luz halógena; G2 ù sem clareamento (controle)/luz halógena; G3 ù clareamento/LED; G4 ù sem clareamento (controle)/LED; G5 ù clareamento/arco de plasma de xenônio; G6 ù sem clareamento/arco de plasma de xenônio. Os grupos experimentais foram submetidos ao clareamento por um período de 14 dias, com exposição diária 4 horas. Os grupos controle foram armazenados em saliva artificial, a 37ºC, por período igual ao clareamento. A união da resina composta ao esmalte obedeceu às recomendações dos fabricantes. Em seguida, todos os corpos de prova foram armazenados em água destilada, por 24 horas, a 37ºC, até a realização do ensaio de resistência ao cisalhamento. O maior valor médio de resistência (14,86 MPa) foi obtido para o grupo G2, e o menor para o grupo G5 (12,32 MPa). A comparação dos grupos através da análise de variância (ANOVA 2-way) demonstrou não haver diferenças significativas para ambos os fatores considerados neste estudo (clareamento e tipo de fonte fotopolimerizadora), bem como para a interação entre estes. Sendo assim, foi possível concluir que o clareamento do esmalte bem como o tipo de fonte fotopolimerizadora utilizada, não interferiram na resistência da união adesiva a este substrato.